產(chǎn)品詳情
一.產(chǎn)品說明
本產(chǎn)品為大腸桿菌高密度發(fā)酵培養(yǎng)基，不含動(dòng)物來源組分。本產(chǎn)品由三部分組成：基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基、碳源流加培養(yǎng)基、氮源流加培養(yǎng)基，增菌效果和產(chǎn)物表達(dá)效果俱佳。
二.配制方法
1.量取90%終體積注射用水于攪拌容器。
2.開啟攪拌，將培養(yǎng)基粉末緩慢加入配制容器，攪拌 15 分鐘至粉末完全溶解，定容。
3.116℃高壓蒸汽滅菌 20 分鐘。
4.使用無菌 NaOH 或 HCl 溶液調(diào)節(jié)培養(yǎng)液至所需 pH 值。
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培養(yǎng)基名稱 |
用途 |
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基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基 |
大腸桿菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基F1 |
基礎(chǔ)發(fā)酵，收獲OD600在20以上。 |
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大腸桿菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基F2 |
基礎(chǔ)發(fā)酵，收獲OD600在40以上。 |
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大腸桿菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基F3 |
更加耐受滅菌；用于基礎(chǔ)發(fā)酵，收獲OD600在40以上。 |
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碳源流加培養(yǎng)基 |
碳源流加培養(yǎng)基C1 |
提供碳源。 |
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碳源流加培養(yǎng)基C2 |
提供碳源。 |
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氮源流加培養(yǎng)基 |
氮源流加培養(yǎng)基N1 |
提供細(xì)菌生長和外源表達(dá)的營養(yǎng)需求。 |
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氮源流加培養(yǎng)基N2 |
提供細(xì)菌生長和外源表達(dá)的營養(yǎng)需求。 |
三.應(yīng)用案例
1.大腸桿菌Z9株發(fā)酵 培養(yǎng)基：F3、C2、N2
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發(fā)酵時(shí)長（h） |
OD600 |
比濁（億/mL） |
濕重（g/L） |
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4 |
22 |
410 |
50 |
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6 |
50 |
960 |
97 |
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8 |
70 |
1540 |
149 |
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9 |
87 |
1660 |
157 |
2.可溶性蛋白表達(dá) 培養(yǎng)基：F1、C1、N1
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發(fā)酵時(shí)長（h） |
OD600 |
濕重（g/L） |
發(fā)酵液蛋白表達(dá)量(mg/L) |
對(duì)照(mg/L) |
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36 |
146 |
211 |
1341 |
500 |
3.包涵體蛋白表達(dá) 培養(yǎng)基：F2、C1、N1
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培養(yǎng)基 |
發(fā)酵批次 |
發(fā)酵時(shí)長 （h） |
濕重 （g/L） |
目的蛋白含量 |
產(chǎn)率 （頭份/L） |
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傳統(tǒng)培養(yǎng)基 |
F008(S) |
13 |
33.6 |
40% |
5161 |
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高密度發(fā)酵培養(yǎng)基 |
F007(S) |
13 |
127.7 |
40% |
13029 |
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F009(S) |
14 |
131.5 |
40% |
19780 |
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F010(S) |
14 |
128.2 |
40% |
23536 |
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